Référents : Badreddine DOUZI (badreddine.douzi@inrae.fr) ; Emilie CLEMENT (emilie.clement@univ-lorraine.fr)
Principe
L’ultracentrifugeuse Beckman Coulter est un équipement de laboratoire conçu pour séparer les constituants d’un échantillon en fonction de leur taille, de leur masse et de leur densité. Elle utilise une vitesse de rotation extrêmement élevée afin de générer une force centrifuge importante, permettant notamment la séparation de particules très fines. Lors de l’ultracentrifugation, les différents composants de l’échantillon migrent à des vitesses variables sous l’effet de cette force. Les particules les plus denses ou les plus grosses sédimentent plus rapidement, tandis que les éléments plus petits restent davantage dans le surnageant. Selon les conditions expérimentales, la séparation peut être réalisée par vitesse de sédimentation ou par densité grâce à un gradient. Cette technique est largement utilisée pour isoler et purifier des protéines, virus, organites cellulaires, membranes et acides nucléiques.
Applications
Purification et séparation des protéines, complexes protéiques et macromolécules.
Isolement des organites cellulaires : noyaux, mitochondries, ribosomes, membranes, etc.
Purification et caractérisation des virus et particules virales.
Séparation des acides nucléiques : ADN, ARN et complexes nucléoprotéiques.
Isolement et caractérisation des nanoparticules et vésicules extracellulaires, notamment les exosomes.
Étude de la taille, de la masse et de la densité de particules biologiques.
Fractionnement cellulaire pour analyser les différents compartiments d’une cellule.
Recherche pharmaceutique et biomédicale pour la purification et la caractérisation de biomolécules.